1ª Patrulla
Zarpa de Kiel el 2 de Julio de 1941 para operar en el Atlántico.
El U331 era uno de los numerosos uboote que operaban dispersos al Sureste de Groenlandia. El día 17 un avión Kondor del 1/KG-40 divisaría al convoy OB346 al Noroeste del canal del Norte. El día 19 el convoy esquivaría a una línea de patrulla formada por cinco uboote . Otra línea de patrulla, creada el día 20, con el U331 y una docena de uboote más también sería burlada por el convoy aunque serían hundidos dos mercantes rezagados.
La noche del 1 al 2 de Agosto el U331 sería reabastecido por el Buque mercante alemán Thalia en el puerto de Cádiz. A partir del día 6 de Agosto el U331, junto a otros uboote , formaría parte de una línea de patrulla entre Gibraltar y las Azores a la espera del convoy HG69. El convoy zarparía de Gibraltar el día 9 y el día 10 sería avistado por el U79, la escolta del convoy evitaría los ataques y los uboote fueron alejados. El U331 conseguiría aproximarse al convoy el día 12 y la noche del día 13 cada vez fue alejado por los escoltas. La operación finalizaría el día 16 sin ningún buque del convoy hundido.
El U331 llegaría a Lorient el 19 de Agosto de 1941.
El U331 estaría asignado temporalmente a la 2.U-Flottille.
2ª Patrulla
Zarpa de Lorient el 24 de Septiembre de 1941 hacia el Mar Mediterráneo.
El U331 cruzaría el estrecho de Gibraltar la noche del 29 al 30 de Septiembre. El U331 era uno de los seis uboote del Grupo Goeben, los primeros tipos VII en entrar en el Mediterráneo, el Grupo lo formaban los uboote U75, U79, U97, U331, U371 y U559. El Grupo puso rumbo Este para operar entre Alejandría y Tobruk.
El día 10 de Octubre de 1941 el U331 se vio envuelto en un combate con tres aviones caza en el Golfo de Sollum. Un tripulante del U331 murió y otro quedaría malherido. El U331 se sumergiría. Poco después volvería a la superficie para sepultar en el mar al tripulante muerto (Btsm. Hans Gerstenich).
El U331 llegaría a su nueva base en Salamis el 11 de Octubre de 1941.
3ª Patrulla
Zarpa de Salamis el 12 de Noviembre de 1941 para realizar una misión especial.
La noche del 17 al 18 el U331 desembarcaría a un equipo de demolición formado por siete soldados en Ras Gibesia (Líbia), su misión era la de dinamitar la línea de ferrocarril de Alejandría. Los soldados llegarían a la costa a bordo de un bote neumático, tomaron tierra al Oeste de El Alamein.
Dos hombres, un soldado y un tripulante del U331 se quedaron a vigilar el bote. Fueron descubiertos por dos soldados británicos. El soldado alemán mataría a los británicos con un cuchillo. Más tarde regresaría el grupo de demolición y abandonaría la costa antes del amanecer del día 18.
El U331 regresó a la zona para recuperar al Grupo pero el bote neumático había volcado y sus ocupantes se vieron obligados a regresar a la playa donde fueron inmediatamente capturados. El tripulante del uboot fue interrogado y contaría toda la historia. Las cargas explosivas fueron encontradas y desactivadas. Tras esperar varias horas el U331 se alejaría de la zona, hacia el Este.
El día 25 el U331 avistaría a un Grupo Naval Británico, este Grupo Naval había zarpado de Alejandría el día anterior. Sin tiempo para preparar el ataque contra el acorazado líder del Grupo el U331 lanzaría cuatro torpedos contra el siguiente, el acorazado HMS.Barham que sería destruido. Tras disparar los torpedos el U331 se desestabilizó y su proa salió a la superficie, tras esto iniciaría una inmersión descontrolada que llevaría al uboot hasta los 250 metros de profundidad. La tripulación lograría estabilizar la nave y escapar de la zona. Del HMS.Barham fueron rescatados 450 supervivientes, murieron 862 tripulantes.
El U331 regresaría a Salamis el 3 de Diciembre de 1941.
Al comandante del U331, el Kptlt. Freiherr Hans-Diedrich von Tiesenhausen se le ordenó dirigirse inmediatamente a Berlín donde sería tratado como un héroe. Una vez se confirmó el hundimiento del Acorazado el Kptlt. Freiherr Hans-Diedrich von Tiesenhausen fue galardonado con la Cruz de Caballero.
4ª Patrulla
Zarpa de Salamis el 14 de Enero de 1942 para operar a la altura de Tobruk.
El U331 quedaría encallado en la arena del fondo marino. Para ayudar a desembarrancar al uboot se desmontaron las espoletas de los torpedos y se lanzaron para aligerar al uboot. Tras varias horas de esfuerzos, incluso se desalojó parte del combustible para perder peso el U331 lograría salir a la superficie.
El día 27 el U331 rescataría a cinco tripulantes de un avión italiano derribado que se encontraban en un bote salvavidas.
El U331 llegaría a La Spezia el 28 de Febrero de 1942.
5ª Patrulla
Zarpa de La Spezia el 4 de Abril de 1942 para realizar una operación de minado.
El día 15 el U331 depositaría las minas a la altura de Beirut. Tras colocar las minas al atardecer se dirigiría al puerto y torpedearía sin éxito al SS.Lyder Sagen (noruego 3.994tn) que se encontraba allí amarrado.
El día 16 el U331, probablemente, hundiría a dos pequeños veleros a cañonazos a la altura de la costa Libanesa. En uno de estos ataques un tripulante del U331 resultaría herido y perdería un dedo de una mano.
El U331 regresaría a Salamis el 19 de Abril de 1942.
6ª Patrulla
Zarpa de Salamis el 9 de Mayo de 1942 para operar a la altura de Tobruk.
El U331 resultaría dañado tras un ataque con cargas de profundidad realizado por un avión el día 20 de Mayo. Tras emerger, se descubriría que a causa de los daños sufridos el uboot no podía sumergirse. El U331 se dirigiría a Messina para efectuar reparaciones.
El U331 llegaría a Messina el 21 de Mayo de 1942.
7ª Patrulla
Zarpa de Messina el 25 de Mayo de 1942 para operar en la costa Libanesa.
El día 4 de Junio el U331 atracaría a un Destructor sin resultado.
El U331 llegaría a La Spezia el 15 de Junio de 1942.
El U331 sería revisado y dotado con nuevo armamento antiaéreo.
8ª Patrulla
Zarpa de La Spezia el 5 de Agosto de 1942.
El día 8 el U331 sería localizado por un avión Hudson del escuadrón 233 (con base en Gibraltar) cerca de las islas Baleares. El avión lanzaría varias cargas de profundidad que no alcanzarían al uboot. El U331 se sumergiría y tras emerger poco después atacaría al avión que aún estaba en la zona. En el combate dos tripulantes del U331 resultaron heridos, el avión tras el combate se alejaría.
El U331 regresaría a La Spezia el 10 de Agosto de 1942.
9ª Patrulla
Zarpa de La Spezia el 12 de Agosto de 1942 para operar entre Algeria y las Islas Baleares.
El U331 regresaría a La Spezia el 19 de Septiembre de 1942.
10ª Patrulla
Zarpa de La Spezia el 7 de Noviembre de 1942 hacia la costa Algeriana.
El día 9 por la tarde el U331 divisaría al transporte USS.Leedstown (americano 9.135tn) cerca de Algeria. El Transporte había sido torpedeado y bombardeado ese mismo día por un avión de la Luftwaffe. Tras recibir dos impactos de torpedo del U331 la tripulación abandonaría la nave.
El día 10 el U331 sería localizado por unos Destructores que los sometieron a varios ataques con cargas que duraron siete horas.
Al amanecer del día 17 se dirigía hacia al Oeste en la superficie cuando sería localizado al Noroeste de Algeria por un avión Hudson del escuadrón 500 (S/Ldr I.C.Patterson) Al ver el avión el U331 se sumergiría.
El Avión regresaría a la zona al cabo de dos horas y localizaría de nuevo al U331.
El avión atacaría al uboot lanzándole cuatro cargas de profundidad. El U331 sufriría daños importantes y entre otras averías no podía sumergirse. A la zona llegaron otros dos aviones que también atacarían al, ya condenado, U331.
La tripulación del U331 se defendió durante casi dos horas. El Kaleun de la nave, Freiherr Hans-Diedrich von Tiesenhausen mostraría una bandera blanca.
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